肉的宰后嫩化其主要归因于肌原玻纤机构的损害，肌原玻纤机构是由内源性淀粉酶酶溶解体现酶可化学降解肌原玻纤和生殖細胞膜骨架淀粉酶酶导致的。与二十多年来一直以来都是青睐重中之重的钙淀粉酶酶酶有所差异，胱天淀粉酶酶酶（caspases）比较近变成了感欲望得话题。胱天淀粉酶酶酶在生殖細胞膜凋亡的审理的阶段起着至关最重要的用途，中仅caspase-3在临死前淀粉酶酶溶解体现中的用途是多多面和冗杂的，往往应当进一次研发。S-亚硝基化经过调接钙保持、水平消化吸收、淀粉酶酶质可化学降解和生殖細胞膜凋亡来调接吃起来，涉及到嫩度和持水水平。现已研发出现 S-亚硝基化能否上涨依赖于线粒体的caspase-3级联体现，这已经是身体肌肉生殖細胞膜凋亡和牛羊肉产品变迁的主要原因。caspase-3的研发重中之重是其与生殖細胞膜凋亡的内在联系，既使，比较少的有研发浅论S-亚硝基化调接caspase-3的制度化。

2024年9月由苏州农林业大专张万刚教导开发团队在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱菌物为该研究提供了亚硝基化表达组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

简体中文版头：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

期刊论文：Journal of Agricultural and Food Chemistry

202几年损害分子：5.7

刊出时长：2024年9月

加盟商院校：南京农业大学

实验资料：蛋白

拜谱具备技术水平：亚硝基化修饰组学

水平行车路线：

一、研发没想到

01.Caspase-3特异性

日前尚不了解NO对caspase-3的调控的功效是否能够归因于NO介导的S-亚硝基化，其他氨水浓度均值的GSNO成为外源性NO批售，以诱发caspase-3的身体之外S-亚硝基化。结局表达，与没得GSNO的组优于，100、200和400μM GSNO组的caspase-3可溶性同质性大大减少（图1），与原本新闻报道同步。GSNO加工处理大大减少caspase-3可溶性的因素诱因仍亟需揭示。

图1 各不相同氧化还原电位的GSNO进行处理对caspase-3活性酶类的作用

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化层度

探究Caspase-3的亚硝基化度，以阐发GSNO对Caspase-3的想法性。经GSNO净化处理后，的测量到caspase-3淀粉酶S-亚硝基化难度添加（图2）。以上結果揭示，外源性GSNO培养出可顺利诱导性caspase-3的休外S-亚硝基化。让人诧异的是，在不来源于GSNO来源于的對照组中的测量到某个衰弱的S-亚硝基化带，这揭示caspase-3或许发现内源性的S-亚硝基化。于此，本探究中caspase-3的S-亚硝基化度较高，而caspase-3的化学活化减轻，这与时候的探究相同。或许，caspase-3的炎症因子朋友S-亚硝基化掩盖位点尚不很清楚，还应该进一大步的思考。

图2 GSNO处里对caspase-3S-亚硝基化平均水平的关系

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化修饰语组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的编码回文序列。橙色标上的编码回文序列表述S-亚硝基化肽，鲜红色标上的C表述S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱图

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3溶解结核蛋白

结淀粉酶质质看做一种生活为主要的组织细胞系骨架淀粉酶质质，在达到肌组织细胞系构成的构成完善性和做收缩性几个方面起着为主要功用，调查S-亚硝基化caspase-3对结淀粉酶质质可吸附的太渗透性的包括为主要实际意义。与Std（未用胱天淀粉酶质质酶-3和GSNO孵育的初期肌黏胶玻璃纤维淀粉酶质质）组较之，0 μM GSNO组（肌原黏胶玻璃纤维和caspase-3的孵育，无GSNO）的完善结淀粉酶质质量重要缩减，警告caspase-3对结淀粉酶质质包括潜在的的淀粉酶质质油脂水解工作能力。在GSNO孵育后，完善结淀粉酶质质的量显著增多（P < 0.05）。最后，当GSNO氧浓度提升时，完善结淀粉酶质质的量坚持上涨（P < 0.05）（图5）。此种显示表达，SNO呈现的caspase-3以级别根据的方试抑制作用结淀粉酶质质的可吸附。

图5.S-亚硝基化caspase-3溶解结核蛋白

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3吸附肌钙淀粉酶-T

肌钙球蛋清酶酶酶-T (TnT)是原肌球球蛋清酶酶酶的缓解承担腿部肌肉紧缩的细条的一定肌原人造氯纶球蛋清酶酶酶。TnT的吸附特证是测量到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化前提下，caspase-3对TnT的吸附状态右图6已知，与Std组（没含caspase-3和GSNO的肌原人造氯纶）比起，caspase-3组中30 kDa TnT片断同质性增强，体现了caspase-3直接参与了TnT的吸附，最后，caspase-3与GSNO的孵育诱发30 kDa TnT缩减。在100和200 μM GSNO组左右沒有测量到分明的差异化(P > 0.05)，而当GSNO的质量浓度以达到400 μM 时，该片断同质性增多(P < 0.05)。这么多显示体现了了SNO呈现的caspase-3对TnT吸附的控定制用。结球蛋清酶酶酶和TnT是caspase-3的比较敏感底物，而GSNO操作缩减caspase-3的抗逆性会诱发肌原人造氯纶球蛋清酶酶酶吸附情况缩减。与此同时阐明，NO引诱的S-亚硝基化会借助呈现半胱氨酸残基来的缓解caspase-3的抗逆性，随之进一个步骤影向其对结球蛋清酶酶酶和TnT的球蛋清酶酶酶蛋白质水解特性，因而影向鸡肉品格。

图6. S-亚硝基化caspase- 3挥发肌钙核蛋白-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、个人总结

本研究试论指在试论S-亚硝基化对caspase-3表达的作用下列关于继而对牛羊肉肌原氯纶身体挥发的作用。核淀粉酶S-亚硝基化不错表达caspase-3的半胱氨酸残基，才能导致caspase-3活性酶类削减，进1步促使了其对牛羊肉肌原氯纶核淀粉酶的核淀粉酶电离实力。

三、拜谱个人心得体会

科学深入分析适用了酶活测量，亚硝基化淡化组学定性分析，WB等验测手法，显示淀粉酶S-亚硝基化行淡化caspase-3的半胱氨酸残基，这引起了caspase-3可溶性的减轻，并举每一步抑制性了其对羊肉肌原纤维材料淀粉酶的淀粉酶油脂水解能力素质。本科学深入分析为解说淀粉酶质亚硝基化对色泽的宏观调控机能保证半个个新的第一人称。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的球脂肪酸组学、突显球脂肪酸组学、分解组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸类型好产品，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺酸性反应、total硫化恢复备份、徘徊巯基，欢迎大家咨询！

选取论文：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663