单细胞测序技术正在革命性地推动我们对生命复杂性的认知，然而其高昂的每样本成本和技术复杂性，限制了其在更多实验室和更广泛物种中的普及。尽管多重样本标记技术能有效“降本增效”，但现有的方法往往受限于抗体阳性植物物种特女性朋友、寡核苷酸淡化成本低过高或进行操作环节繁杂。近日，南方海洋科学与工程广东实验室（广州）的陈凯专家组织在Journal of Genetics and Genomics上发表了一项创新性方法学研究，提出了一种名为HEATag的新型样本标记策略，为我们提供了一个低资金、跨外来物种、全机构兼容的全新解决方案。

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Journal of Genetics and Genomics (JGG)是由全球地理技术高校基因性与发育成熟海洋分子结构菌物学科研所和全球基因性针灸学会承办的国.际科研杂志，秉承于宣传报道活力地理学和中医药学基因性学这个行业域的原创网性科研重大成果。JGG 202多年度作用细胞7.1，Scopus科研杂志评估要求CiteScore 9.9，榜排JCR 202多年度GENETICS & HEREDITY这个行业域Q1区(Top 10%)，BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY这个行业域Q1区，榜排全球地理技术高校杂志系统分割海洋分子结构菌物学类别1区(Top杂志)，基因性学和生化模式与分子结构海洋分子结构菌物学小类双1区。

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什么呢是HEATag

婉转的“二三合一”装修设计

HEATag是由凝集素和HUH内切酶结构的构建蛋白酶

「定位手机器」模组 - 凝集素

能够识别细胞膜上广泛存在且高度保守的糖基化装饰（如GlcNAc和Neu5Ac）。

「对接器」接口 - HUH内切酶

可以序列特异性地与普通的、无需化学修饰的单链DNA（ssDNA）引索长条码对其进行共价无线连接。

“1+1>2”的结果：将两者融合，得到的HEATag蛋白既能通过凝集素牢牢锚定在细胞膜上，又能通过HUH蛋白携带特定的DNA条形码进行样版标出与追溯。

Fig1: HEATag许多箭头作用示企图图

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初级教程检定

HEATag才是有能开打？

需要在差异标准下，保证 蒲乳期宠物组织系单组织混样测序

实验室里的设计再精妙，也要经过真实样本的 “实战考验” 才算数。科研专业团体为 HEATag 如何设置了多轮 “阻力测试图片”，从癌体细胞系到癌体细胞质，从干燥到超高温，从新鲜范本到固定位置范本，全周边所有地方确认它的平稳性和靠得住性。

第一个轮测评根据喂乳宠物血癌肿瘤细胞系：具体分析人工使用了是来自于人、鼠、仓鼠5个鱼类的七种血癌肿瘤细胞（HEK293T、K562、MEF、CHO），在在常温使用 HEATag 标记图片后交织测序。之后回收利用的 11447 个血癌肿瘤细胞中，85.66% 都能可以通过 HEATag 方形码精确匹配好到原鱼类，样版间交错式危害较少，UMAP 聚类具体分析法具体分析往往是单独证明文件，HEATag 方形码与鱼类特男人染色体组症状角度不对。 继续，检验水平切实骤优化：研究探讨关联人员试 在 4℃下标注符号生鲜上皮細胞、在恒温下标注符号甲醇确定上皮細胞，甚至会直接的标注符号上皮細胞核。结论但从未醒目：拥有水平下，子范本标价签与植物物种短信均包括特好的关联性，分拆最准率超 95%。然而甲醇确定会造成中度的转录本交叉点污染破坏，上皮細胞核分离纯化会一少部分 RNA 掉失，上皮細胞多种类型的批注结论但从未与生鲜子范本持续共同，事实证明 HEATag 能能标注符号各不相同治理水平下的调查子范本。

Fig2: HEATag 可在不一样生活条件下完成任务单细胞核转录组混样定性分析

可能标记符号母乳喂奶食草小动物和大海无脊椎骨食草小动物的原代生殖细胞

若说神经人体细胞系测试方法是 “基础理论题”，那公司模板也就是 “额外增加题”， 这样模板之所以因神经人体细胞类多样化、生态环境适于性特有，已成为记号能力的 “重困惑”，而 HEATag 刚好在这样 “重困惑” 上塑造了资源优势。

研究团队选择了大鼠和小鼠的睾丸组织结构，这类样本包含精原干细胞、精母细胞、精子细胞等多种类型，对标记一致性的要求极高。实验中，两种动物的睾丸用特异性 HEATag 条形码标记后混合测序，最终获得的 14663 个细胞不光能被精确分别，所有主要的血细胞分类的聚类分析报告单都明白可辨。

更令人惊喜的是HEATag对海域海洋生物的自适应性。HEATag能在海水的等渗溶液中标记新鲜的海洋动物细胞（如海月水母、大西洋海刺水母）。研究人员用人工海水稀释的HEATag 标记了水母和珊瑚的组织细胞后在 BD Rhapsody 平台测序，最终回收的 6452 个细胞中，HEATag 条型码与植物物种转录组更具较高一样的性，并没有显示因高盐室内环境致使的 “标识出现异常”。后续对甲醇固定的海洋生物细胞测试结果显示，HEATag 在固定样本中的拆分效果优于新鲜样本。

Fig3: HEATag 可改变乳期猎物组织机构样表强有力的加密管控 scRNA-seq 探讨

Fig4: HEATag可变现新鲜感海洋环境无脊椎骨节肢动物多沉 scRNA-seq 分享

HEATag与体细胞的依照不易引致转录组的相关系数修改

对样本标记技术来说，“不影响样本本身的 RNA 特征” 是底线。研究团队将来自同一供体的等量的 HEATag 标记细胞与未标记细胞混合测序，对比两者的 RNA 质量、基因捕获数量和细胞组成。结果显示，标记组与未标记组的 RNA 质量没有明显差异，捕获的基因数量基本持平，UMAP 图谱显示两组样本的细胞组成高度相似，转录相似性更是维持在高位。无论是细胞簇的注释结果，还是不同细胞类型的基因回收数量，两组都几乎一致，没有出现 “标记导致的基因表达异常”。这意味着，HEATag在提交标记符号目标的同一时间，会对之后的转录酚类化合物析有串扰，保护了探讨数据分析的逼真性。

Fig5: HEATag不想会影响样板的 RNA 表达出经营模式

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素可期

HEATag 能为单生殖细胞设计分享一些？

HEATag 的市场价值，远不至于 “解决方法标识的问题”，它的灵活机动性和共通性，时未为单内部学习开放更大可能会性

从适用场面来谈

HEATag 能履盖从 “简单比效解析”（如癌团体落实与一切正常团体落实、性药物加工与比较）到 “大总量论述分析”（如团体落实細胞图谱制作、mtk量需求量）的全范围之内需求量。近年来 PIP-seq、Stereo-cell 等新型产品可寻址技术设备的成长 ，HEATag 还能进一歩升降单細胞论述分析的通量，助推科学拜谱生物落实更广总量的工程。

从跨区域优势看看

HEATag 往往用来于转录组学，还能与表观基因遗传组学、蛋白质含量质组学、范围组学等技术应用应用紧密结合，能够拜谱生物引索和寡核苷酸队列，HEATag 需要轻松自在渗透有差异的组学流程步骤，不损害数据信息捉捕淬硬层。的同时，立于HEATag还需要成长 单细胞核糖组学探究技术应用应用。

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配合动态图片

拜谱生物制品与陈凯副教授促成首次进行合作意项

有必要目光的是，在 HEATag 枝术表显现出巨形用潜力股的背静下，拜谱动物制品已与华南地区大海环境物理学与项目工程山东实践设计室（东莞）陈凯老师实现目标教学过程联合的想法。彼此项目致力于 HEATag 枝术的产业的发展化落地实施、科技管理转化成等位置做好厚度通力合作，深入推进这一个低投入、跨植物物种的单人体神经元标记符号枝术很快用于现实情况科技管理画面，为更高实践设计室提拱优质、生活的单人体神经元调查专用工具，推助科技管理本职工作家在人体神经元动物制品学、大海环境动物制品学、常见疾病制度等方面拥有更高攻克